脂質(zhì)體是一種優(yōu)良的靶向給藥載體, 脂質(zhì)體的大小對脂質(zhì)體的體內(nèi)靶向行為具有重要影響 , 微孔濾膜擠壓過濾是控制脂質(zhì)體大小的有效方法 , 采用膜孔徑小于0.2μm的微孔濾膜擠壓濾過還可解決脂質(zhì)體的滅菌難題 。目前市場上的微孔濾膜品種很多, 各品種由于膜材料和制備技術(shù)不同 , 膜理化性質(zhì)和膜結(jié)構(gòu)差別很大。微濾膜品種選擇不當(dāng), 不僅可影響膜擠壓工藝的可行性 ,而且可能引起脂質(zhì)體中藥物的滲漏。甘草酸是中藥甘草的主要有效成分, 具有保肝降酶 、抗炎 、免疫調(diào)節(jié)和抗病毒作用。甘草酸生成銨鹽后水溶性增強(qiáng)。將甘草酸單銨包裹于小于100nm的脂質(zhì)體中可望提高甘草酸單銨在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的靶向性, 從而提高療效降低副作用 。本試驗(yàn)探討了微濾膜材料與結(jié)構(gòu)對甘草酸單銨脂質(zhì)體擠壓過濾工藝的影響 ,以優(yōu)選最佳的微孔濾膜品種 。
1 儀器與設(shè)備
R-205型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 (瑞典 BUCHI公司)、KQ-500E型超聲清洗儀 (昆山舒美超聲儀器有限公司)。TU-1800S紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)、H600-11透射電子顯微鏡 (日本日立公司 )。Waters515 泵,Waters2487紫外-可見檢測器,Rheodyne進(jìn)樣器,中科院大連化學(xué)物理所WDL-95色譜工作站。
2 微孔濾膜
聚碳酸酯微孔濾膜、聚四氟乙烯微濾膜、聚偏二氟乙烯微濾膜 、尼龍微濾膜、聚丙烯膜 、混合纖維素酯微濾膜 、醋酸纖維素膜 、硝酸纖維素膜和聚醚砜微濾膜。
3 討論
微孔濾膜擠壓工藝對控制脂質(zhì)體大小和除菌具有重要意義,常用微孔濾膜材料有聚酰胺(尼龍-6和尼龍-66),聚四氟乙烯、聚偏氟乙烯、聚丙烯、聚碳酸酯、聚醚砜、硝酸纖維素、醋酸纖維素和混合纖維素酯等。微濾膜材料的理化參數(shù)主要有親水親油性、對熱穩(wěn)定性、對酸堿穩(wěn)定性和對常用溶劑的穩(wěn)定性。微孔濾膜的結(jié)構(gòu)參數(shù)主要有膜孔徑大小、孔結(jié)構(gòu)、孔隙率和膜厚度等, 微孔濾膜的孔徑規(guī)格常用的有0.05、0.1、0.2、0.22、0.4、0.45、0.8 μm。按微孔結(jié)構(gòu)和形態(tài)可分為曲徑微濾膜和核孔微濾膜。目前市面上的微孔濾膜主要是曲徑微濾膜,曲徑膜一般厚100～200μm,膜上微孔數(shù)量占膜面積的60%～85%(孔隙率 ),但其微孔是不對稱的,孔道彎彎曲曲,時(shí)大時(shí)小,屬深層過濾機(jī)理,易阻塞。
核孔微濾膜又名核徑跡-蝕刻膜, 是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種新型微孔濾膜 , 這種膜是利用核反應(yīng)堆中的熱中子使鈾-235裂變, 裂變產(chǎn)生的碎片穿透有機(jī)高分塑料薄膜 ,在裂變碎片經(jīng)過的路徑上留下一條狹窄的輻照損傷通道,這通道經(jīng)氧化后,用適當(dāng)?shù)?/span>化學(xué)試劑蝕刻,即可把薄膜上的通道變成園柱狀微孔。核孔膜一般厚5～15μm,孔隙率5%～20%,但其微孔基本是圓柱形的直通孔 , 均勻?qū)ΨQ 、圓整光滑 ,因此濾速快, 不易阻塞 。
本試驗(yàn)結(jié)果表明微孔濾膜材料和結(jié)構(gòu)對甘草酸單銨脂質(zhì)體擠壓過濾工藝具有顯著影響,甘草酸單銨脂質(zhì)體在擠壓條件下容易透過曲徑結(jié)構(gòu)的疏水的尼龍微濾膜、聚四氟乙烯膜,聚偏氟乙烯膜和聚丙烯膜,很難透過曲徑結(jié)構(gòu)的親水的聚醚砜膜 、混合纖維素酯膜 、硝酸纖維素膜和醋酸纖維素膜,但可透過核孔結(jié)構(gòu)的親水的聚碳酸酯微濾膜。其原因在于脂質(zhì)體特殊的磷脂雙分子結(jié)構(gòu),導(dǎo)致脂質(zhì)體內(nèi)外表面均具親水性,而雙分子層之間具有疏水性。對于親水的曲徑微孔濾膜,親水的脂質(zhì)體與微濾膜具有較強(qiáng)的吸引力,由于曲徑膜較厚,孔道長而彎曲粗糙、并時(shí)大時(shí)小,所以即使增大壓力也濾過困難 ;但對于親水的核孔微濾膜,由于膜很薄,孔道短而光滑均勻,故脂質(zhì)體易擠壓濾過。而對于親油的曲徑微濾膜,親水的脂質(zhì)體與微濾膜之間的吸引力很小,因此也容易擠壓濾過。本試驗(yàn)甘草酸單銨脂質(zhì)體是采用薄膜分散法結(jié)合超聲法制備的,擠壓過濾前大部分脂質(zhì)體大小在50～300nm之間,故采用0.2μm微濾膜與0.45μm微濾膜擠壓濾過的速率相差不大;雖然脂質(zhì)體具有柔性 ,可通過直徑比它小的微孔,但0.1μm微濾膜擠壓時(shí)阻力明顯增加, 需加大壓力方能濾過 。
