微孔濾膜在枸杞子中甜菜堿含量測定中的研究
枸杞子為茄科植物寧夏枸杞的干燥成熟果實(shí)，是我國傳統(tǒng)中藥材，具有治療糖尿病、保護(hù)視網(wǎng)膜、抗氧化等作用。甜菜堿是枸杞果實(shí)、葉、柄中主要的生物堿類成分，在人體內(nèi)起甲基供體的作用，具有促進(jìn)脂肪代謝、調(diào)節(jié)滲透壓、抗應(yīng)激等功效，被認(rèn)為是枸杞子的主要活性物質(zhì)之一。天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到本研究建立了測定枸杞子中甜菜堿含量的HPLC法；并以甜菜堿含量為指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對其提取方法進(jìn)行了篩選；同時(shí)，將所建HPLC法與《中國藥典》方法進(jìn)行了比較，旨在為枸杞子的質(zhì)量控制和甜菜堿的提取提供方法支持。
1儀器
1260型HPLC儀（美國Agilent公司）；XS205DU型電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；CQ-200B-DST型超聲波清洗器（上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠）；800Y型粉碎機(jī)（永康市鉑歐五金制品有限公司）。
2供試品溶液制備
取枸杞子樣品，于50℃烘干后，冷凍，粉碎，過二號篩，精密稱取粉末1.0g，按一定方法提取后，用0.45μm天津津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
3甜菜堿提取方法篩選
3.1單因素試驗(yàn)
（1）提取方法：精密稱取干燥后的枸杞子樣品（批號：NKY01）6份，每份1.0g，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30mL，稱定質(zhì)量。取3份超聲（功率：250W，頻率：33kHz，下同）提取60min，另外3份加熱回流提取60min，均冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.45μm津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按外標(biāo)法計(jì)算甜菜堿含量。結(jié)果，超聲提取和加熱回流提取的提取液中甜菜堿的平均含量分別為2.20％和2.19％（n＝3），兩種方法所得甜菜堿的含量相似。故綜合考慮實(shí)際操作和人為影響，最終選擇超聲提取作為枸杞子中甜菜堿的提取方法。
（2）提取溶劑：精密稱取干燥后的枸杞子樣品（批號：NKY01）7份，每份1.0g，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇、80％甲醇、70％甲醇、60％甲醇、50％甲醇、水和0.1mol/L鹽酸溶液各30mL，稱定質(zhì)量，超聲處理40min，冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用相應(yīng)提取溶劑補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.45μm津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按外標(biāo)法計(jì)算甜菜堿含量。結(jié)果，上述溶劑提取液中甜菜堿的含量分別為2.21％、2.10％、1.95％、1.82％、1.80％、1.51％、1.43％，其中含量較高的溶劑依次為甲醇、80％甲醇、70％甲醇。
（3）提取時(shí)間：精密稱取干燥后的枸杞子樣品（批號：NKY01）8份，每份1.0g，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30mL，稱定質(zhì)量，分別超聲提取20、25、30、35、40、45、50、55min，冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.45μm津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按外標(biāo)法計(jì)算甜菜堿含量。結(jié)果，上述提取時(shí)間提取液中甜菜堿的含量分別為1.68％、1.85％、2.02％、2.10％、2.13％、2.20％、2.21％、2.19％?？梢?，當(dāng)提取時(shí)間超過45min后，甜菜堿含量的變化不大。
4討論
綜上所述，本研究建立了甜菜堿含量測定的HPLC法，并通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)篩選了枸杞子中甜菜堿的最佳提取方法，通過比較本研究所建HPLC法測定結(jié)果與《中國藥典》薄層色譜法測定結(jié)果的差異，發(fā)現(xiàn)幾乎無明顯差異。由此表明，本研究成功建立了枸杞子中甜菜堿的定量分析方法和提取方法，可為枸杞子中甜菜堿的含量測定提供方法支持。
以上內(nèi)容僅供參考，如需咨詢購買相關(guān)產(chǎn)品歡迎到天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司咨詢購買。
1儀器
1260型HPLC儀（美國Agilent公司）；XS205DU型電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；CQ-200B-DST型超聲波清洗器（上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠）；800Y型粉碎機(jī)（永康市鉑歐五金制品有限公司）。
2供試品溶液制備
取枸杞子樣品，于50℃烘干后，冷凍，粉碎，過二號篩，精密稱取粉末1.0g，按一定方法提取后，用0.45μm天津津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
3甜菜堿提取方法篩選
3.1單因素試驗(yàn)
（1）提取方法：精密稱取干燥后的枸杞子樣品（批號：NKY01）6份，每份1.0g，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30mL，稱定質(zhì)量。取3份超聲（功率：250W，頻率：33kHz，下同）提取60min，另外3份加熱回流提取60min，均冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.45μm津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按外標(biāo)法計(jì)算甜菜堿含量。結(jié)果，超聲提取和加熱回流提取的提取液中甜菜堿的平均含量分別為2.20％和2.19％（n＝3），兩種方法所得甜菜堿的含量相似。故綜合考慮實(shí)際操作和人為影響，最終選擇超聲提取作為枸杞子中甜菜堿的提取方法。
（2）提取溶劑：精密稱取干燥后的枸杞子樣品（批號：NKY01）7份，每份1.0g，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇、80％甲醇、70％甲醇、60％甲醇、50％甲醇、水和0.1mol/L鹽酸溶液各30mL，稱定質(zhì)量，超聲處理40min，冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用相應(yīng)提取溶劑補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.45μm津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按外標(biāo)法計(jì)算甜菜堿含量。結(jié)果，上述溶劑提取液中甜菜堿的含量分別為2.21％、2.10％、1.95％、1.82％、1.80％、1.51％、1.43％，其中含量較高的溶劑依次為甲醇、80％甲醇、70％甲醇。
（3）提取時(shí)間：精密稱取干燥后的枸杞子樣品（批號：NKY01）8份，每份1.0g，分別置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30mL，稱定質(zhì)量，分別超聲提取20、25、30、35、40、45、50、55min，冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.45μm津騰微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按外標(biāo)法計(jì)算甜菜堿含量。結(jié)果，上述提取時(shí)間提取液中甜菜堿的含量分別為1.68％、1.85％、2.02％、2.10％、2.13％、2.20％、2.21％、2.19％?？梢?，當(dāng)提取時(shí)間超過45min后，甜菜堿含量的變化不大。
4討論
綜上所述，本研究建立了甜菜堿含量測定的HPLC法，并通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)篩選了枸杞子中甜菜堿的最佳提取方法，通過比較本研究所建HPLC法測定結(jié)果與《中國藥典》薄層色譜法測定結(jié)果的差異，發(fā)現(xiàn)幾乎無明顯差異。由此表明，本研究成功建立了枸杞子中甜菜堿的定量分析方法和提取方法，可為枸杞子中甜菜堿的含量測定提供方法支持。
以上內(nèi)容僅供參考，如需咨詢購買相關(guān)產(chǎn)品歡迎到天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司咨詢購買。
